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轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞——口服應(yīng)用

更新時間:2023-06-02      點擊次數(shù):664

以細(xì)胞轉(zhuǎn)染為目的的核酸口服遞送是一種令人興奮的新遞送方法,可以改善DNA 疫苗接種和基因治療的結(jié)果。它作為一種非侵入性應(yīng)用,使加藥過程成倍地容易。然而,這種方法受到基因傳遞載體在消化系統(tǒng)惡劣環(huán)境屬性下生存能力的限制。從酸性 pH 值到降解酶,載體必須能夠運(yùn)輸其有效載荷,同時保護(hù)其完整性,以在所需位置實現(xiàn)細(xì)胞攝取。

分支雙親肽膠囊 (BAPC) 已被證明可以通過口服應(yīng)用成功地用 dsRNA 轉(zhuǎn)染昆蟲細(xì)胞。該研究試圖沉默豌豆蚜蟲 (Acyrthosiphon pisum) 和紅面粉甲蟲 (Tribolium castaneum) 中的基因,從而導(dǎo)致致命結(jié)果。攝入 BAPC 復(fù)合的 dsRNA 后,豌豆蚜蟲在 4-5 天內(nèi)死亡。在沒有 BAPC 的情況下喂食相同數(shù)量的 dsRNA 的蚜蟲需要 11-12 天才能死亡。對于紅色面粉甲蟲,大約 75% 通過 BAPC 提供的 dsRNA 被殺死。僅喂養(yǎng) dsRNA 導(dǎo)致死亡率低于 30%。這些結(jié)果表明 BAPC 顯著提高了 dsRNA 口服遞送的有效性。

當(dāng) dsRNA 添加到 BAPC 時,它們圍繞膠囊的陽離子表面形成緊湊的簇。 BAPC 可穩(wěn)定添加的 dsRNA 并防止任何降解,同時增強(qiáng)腸道上皮細(xì)胞對它們的吸收。與 BAPC 復(fù)合的 dsRNA 不僅能夠逃脫腸道,組織分析還表明它能夠在全身其他部位積聚。這些結(jié)果表明有望進(jìn)一步改進(jìn)其他昆蟲物種的 RNAi 敲除實驗,尤其是那些對于顯微注射而言太小的昆蟲。  


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