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如何為 ELISA 試劑盒準(zhǔn)備條件培養(yǎng)基樣品

更新時(shí)間:2023-08-01      點(diǎn)擊次數(shù):572

如何準(zhǔn)備條件培養(yǎng)基樣品

我們建議準(zhǔn)備無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基樣品,因?yàn)檠逋锌赡墚a(chǎn)生顯著背景信號(hào)的細(xì)胞因子。如果需要測(cè)試含有血清的培養(yǎng)基,我們建議還運(yùn)行未培養(yǎng)的培養(yǎng)基空白來(lái)評(píng)估基線信號(hào)。然后可以從培養(yǎng)基樣本數(shù)據(jù)中減去該基線。

  • 第 0 天,在含有完quan培養(yǎng)基的 100 mm 組織培養(yǎng)板中接種約 100 萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。*

  • 第3天,除去培養(yǎng)基并用6-8ml無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基(例如含有0.2%小牛血清的培養(yǎng)基)替換培養(yǎng)基。

  • 第 5 天,將培養(yǎng)基收集到 15 ml 管中。在 4℃ 的離心機(jī)中以 2,000 rpm 的速度離心 10 分鐘。保存上清液。將上清液轉(zhuǎn)移至 1.5 ml Eppendorf 管中。將上清液儲(chǔ)存在-80°C 直至實(shí)驗(yàn)。大多數(shù)樣品可以通過(guò)這種方式保存至少一年。

*最佳接種細(xì)胞數(shù)量因細(xì)胞類型而異,可能需要憑經(jīng)驗(yàn)確定。

注意:如果需要進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),強(qiáng)烈建議在制備后對(duì)所有樣品進(jìn)行分裝,大程度地減少多次凍融循環(huán)導(dǎo)致的細(xì)胞因子降解。

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