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genovis產(chǎn)品介紹—IgA1 特異性蛋白酶

更新時間:2024-01-26      點(diǎn)擊次數(shù):875

IgASAP Sub1 是一種 IgA1 特異性蛋白酶,可在鉸鏈上方的一個特定位點(diǎn)消化人類 IgA1,產(chǎn)生完整且同質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段。

該酶能夠生成完整的單價 Fab 片段以及 IgA1 的中水平分析,從而有助于在疫苗、治療和診斷等開發(fā)過程中進(jìn)行 IgA1 表征。

  • 實(shí)現(xiàn)IgA1 的中層表征質(zhì)量控制

  • 快速– 在 1 小時內(nèi)生成均質(zhì)的 Fab 和 Fc 片段

  • 高度特異性– 人類 IgA1 鉸鏈上方有一個消化位點(diǎn)

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人類 IgA1 的位點(diǎn)特異性消化

為了證明 IgASAP Sub1 的位點(diǎn)特異性,將市售的人骨髓瘤 IgA1 用凍干的 IgASAP Sub1 在 37°C 下消化 1 小時,并與未消化的 IgA1 進(jìn)行比較。由于 IgA1 攜帶多個 N- 和 O- 聚糖,因此使用 OmniGLYZOR 試劑盒處理樣品,包括在變性條件下使用 PNGaseF 凍干進(jìn)行額外的去糖基化步驟,以去除所有 N-聚糖,以方便數(shù)據(jù)解釋。
使用 IgASAP Sub1 的消化快速、簡單,并且在生理?xiàng)l件下進(jìn)行,酶的特異性可防止 IgA1 的過度消化。盡管起始材料不同,但數(shù)據(jù)清楚地顯示了人 IgA1 上鉸鏈區(qū) (VPSTPP / TPSPST) 的單個消化位點(diǎn),并強(qiáng)調(diào)了使用中級工作流程為此類復(fù)雜樣品生成高分辨率質(zhì)量數(shù)據(jù)的優(yōu)勢。


圖 1. IgA1 的位點(diǎn)特異性消化。 a)工作流程示意圖。來自人骨髓瘤的市售 IgA1的 N-和 O-去糖基化b)重鏈 (HC) 以及 N-和 O-去糖基化c) scFc 片段和d) 的解卷積質(zhì)譜使用 IgASAP Sub1 在 37°C 消化 1 小時后的 Fd 片段。 HC 和 scFc 片段的異質(zhì)性源自多個 C 末端截斷和剩余的延伸 O-聚糖,未被 OmniGLYZOR 去除。通過反相色譜(ACQUITY Premier Protein BEH C4,300 ?,1.7 µm 2.1 x 100 mm,Waters™)分離樣品,并使用 ESI-QTOF MS(Bruker Impact II)進(jìn)行分析。

IgASAP Sub1 凍干   貨號:I0-IA1-010

用于 IgA1 以上鉸鏈消化的凍干酶。

IgASAP Sub1 凍干劑以凍干粉末形式提供,裝在 1000 單位小瓶中,用于消化 1 mg IgA1。

  • 方法開發(fā)的靈活格式

  • 可以組合酶以提高效率

  • 適合自動化工作流程

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