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當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 實驗試劑 > 試劑盒 > K61010MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Ex

MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Ex

簡要描述:MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit
MagVigen全血、PBMC或細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:K61010
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2024-08-21
  • 訪  問  量:483

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號K61010
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥

MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit


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產(chǎn)品內(nèi)容

  • mag vigen DNA捕獲納米顆粒
  • 裂解緩沖液
  • 洗滌緩沖液
  • 洗脫緩沖液
  • 蛋白酶K溶液

需要但不包括的材料

  • 磁性架(NVIGEN目錄號A20006)
  • 異丙醇(分子生物學(xué)級)
  • 乙醇(200度)
  • 美國公共廣播公司

協(xié)議

注意:

  • 制備清洗緩沖溶液:在每550 μl清洗緩沖儲備液中加入450 μl異丙醇,制成清洗緩沖液。
  • 使用前充分渦旋珠子。
  • 以下方案使用150 μl作為提取起始體積。對于其他體積,請按比例縮放每個步驟中使用的試劑。
  1. 將150 μl樣品轉(zhuǎn)移到1.5ml Eppendorf試管中。如果樣品量較少,加入PBS補足體積。對于全血樣品,即從60 μl或75 μl樣品開始,用等體積的PBS稀釋。

  2. 加入5 μl蛋白酶K溶液,加入150 μl細(xì)胞裂解緩沖液。輕輕混合均勻,并在55℃下孵育30分鐘

  3. 向裂解緩沖液中加入5μl MagVigen DNA捕獲納米顆粒。渦旋混合均勻。向裂解反應(yīng)中加入300 μl異丙醇,渦旋混合。室溫下孵育20分鐘。

  4. 將樣本管放在磁性架上沉淀珠子,直到溶液澄清(約5分鐘)。慢慢取出并丟棄上清液。注意不要帶走任何珠子,盡可能多地移除溶液。

  5. 從磁鐵上取下樣本管,加入150 μl清洗緩沖液。通過移液或倒置混合。短暫旋轉(zhuǎn),使溶液到達(dá)試管底部。在磁性架上沉淀珠子,直到溶液澄清(大約1-3分鐘),然后去除上清液并丟棄。

  6. 添加150μl 80%乙醇(清洗2),通過移液混合。短暫旋轉(zhuǎn),使溶液到達(dá)試管底部。在磁性架上沉淀珠子,等到溶液澄清,去除上清液并丟棄。

  7. 重復(fù)步驟6,用80%乙醇再次清洗(清洗3)。

  8. 將樣本管放在磁性架上,風(fēng)干顆粒約1分鐘。

  9. 向珠子中加入50 μl洗脫緩沖液,并充分混合。室溫下孵育1分鐘。

  10. 將樣本管放置在磁性支架上1-2分鐘。小心地從Eppendorf管底部收集洗出液,不要擾動沉淀。

  11. 重復(fù)步驟9和10進(jìn)行另一次洗脫。洗出液含有提取的DNA。

注意: 對于要求高樣品清潔度的下游應(yīng)用,將樣品放在磁鐵旁邊,以消除殘留珠子的可能性。

表1。每個步驟中使用的試劑體積。

名字體積(微升)體積(微升)
樣品(全血、PBMC層或分散在PBS中的細(xì)胞)120150
蛋白酶K溶液45
裂解緩沖液120150
磁珠3.24
異丙醇240300
清洗緩沖液(清洗1)120150
新鮮的80%乙醇(清洗2和3)120 x 2150 x 2
洗脫緩沖液,2X40 x 250 x 2

MagVigen™ Whole Blood, PBMC or Cell Genomic DNA Extraction Kit








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